PERFEMIKER® AuroraGelTM(Phenol Red Free) Matrix是從富含胞外基質蛋白的小鼠腫瘤中提取出的天然基底膜基質。主要依次為層粘連蛋白(Laminin)、IV 型膠原蛋白(Col-IV)、巢蛋白(Entactin)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(Heparan sulphate proteoglycans)及多種細胞因子,如類胰島素生長因子(IGF- 1)、轉化生長因子β(TGF-β) 、血管內皮生長因子(VEGF)、表皮生長因子(EGF)、成纖維細胞生長因子(bFGF)等。在室溫條件下,聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化。產品溶解于高糖DMEM 中,且非定制產品均添加了50μg/mL 慶大霉素。適用于與細胞增殖或分化相關的2D或3D培養(yǎng),也適用于細胞形態(tài)學研究。 常被應用于腫瘤細胞的遷移或侵襲、體外血管生成、主動脈環(huán)和細胞球培養(yǎng)等。
推薦應用
細胞增殖或分化相關的二維或三維培養(yǎng),以及細胞形態(tài)的研究,相關應用主要有:細胞的遷移或侵襲、體外血管生成、主動脈環(huán)和細胞球培養(yǎng)等。
產品參數
來源:Engelbreth-Holm-Swarm murine sarcoma
外觀:
①顏色:產品表現(xiàn)為半透明淡黃色
②形態(tài):4℃融解后,呈液態(tài)
濃度:蛋白濃度范圍在8~13mg/mL之間
內毒素:≤ 4.5EU/ mL
LDEV:無
凝膠時間:室溫條件下5-30min凝膠,37°C時成膠速度加快
產品質量控制規(guī)范
• 每個批次小鼠均經過篩選無鼠源病毒、無病原菌和支原體、無寄生蟲和原蟲,有動物健康報告,確保對生產使用的小鼠進行嚴格控制;
• 對EHS 腫瘤進行包括LDEV 在內的多種病原體進行廣泛的PCR 檢測,微生物檢測、內毒素檢測,確保對生產過程中使用的原材料進行嚴格控制;
• 使用PCR 技術擴增產品中支原體和LDEV 病毒序列,結果為陰性;
• 使用BCA 方法測定蛋白濃度;
• 使用凝膠限度檢查法檢測產品內毒素水平;
• 使用直接接種法檢測產品微生物,結果為無真菌和細菌檢出;
• 使用SDS-PAGE 法檢測產品,電泳結果為目的條帶與參照品一致;
• 能快速成膠,在37℃溫度下能穩(wěn)定保持14 天;
• 每批次產品均通過細胞3D 培養(yǎng)和細胞增殖實驗。
運輸與保存方法
干冰運輸。-20℃凍存(不要放在無霜冰箱內),有效期兩年。
*操作注意事項
1. PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠的融化與保存
注意:PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠對溫度非常敏感,千萬不可多次重復凍融。PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠的分裝以及凝膠前的準備過程中都必須在冰上(4℃)操作,因為溫度稍微提高,都很可能出現(xiàn)成膠現(xiàn)象,從而導致基質膠不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進行預冷。
1)收到產品后,如果暫時不使用,請整瓶直接放到-20℃凍存(不要放在無霜冰箱內)。
2)第一次使用,將整瓶PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠包埋到碎冰中再放到4℃冰箱中,等待其充分融解。
3)產品在每次由冷凍狀態(tài)變?yōu)槿诮鉅顟B(tài)時,請適當搖晃或使用移液器吹吸,確保體系內部蛋白分布均勻。
2.PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠的使用特別注意
1)基質膠在22-35℃能夠快速成膠。可用無血清培養(yǎng)基來稀釋PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠,稀釋后需要立即使用。
2) PERFEMIKER® AuroraGelTM系列基質膠均為無菌產品,產品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行,與產品接觸的實驗器材(如:槍頭、凍存管等)使用前需預冷(提前降溫)。
3)請您在使用過程中不要過長時間地用手握住裝有本產品的容具,防止體溫使產品凝結;若在較短時間內造成產品較為厚重粘稠,您可以將本產品重新置于0℃ - 4℃的環(huán)境內1-2 h 使其恢復流動性,不影響使用。
4)本產品僅供科研使用,禁止用于人體。
3.避免污染
實驗操作人員需嚴格區(qū)分實驗操作臺、清潔區(qū)和污染區(qū),確保插取吸頭、加樣、丟棄吸頭的動作呈單向流動。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |